荧光PCR仪滤光片的选择考虑

荧光定量PCR技术（Real-time Quantitative PCR），是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准

曲线对未知模板进行定量分析的方法。荧光定量PCR以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学

研究中的重要工具，目前已得到广泛应用（如转基因动植物检测、RNAi基因失活率检测、病原微生物或病毒含量检测、基因差异表达、基因分型）。

PCR仪选择滤光片应当注意几点：

1.首先明确检测物质（例如荧光染料）对应的激发波长和发射波长，这样才能准确选择相应的滤光片组合。

2.由于检测物质被激发出的荧光信号微弱，为了更准确提取有用信号，需要过滤杂散光的荧光滤光片组合拥有很好的截止背景（一般达到OD5-6）；

可以凸显荧光信号。

3.要明确一点荧光染料对应的激发和发射波长，与所选择的激发滤光片和发射滤光片中心波长并非等同概念，这主要是出于降低滤光片制作难度

和成本的考虑；滤光片激发通道和发射通道选取了荧光染料对应激发和发射波长范围内信号较强的位置，同时又相互屏蔽；互不干扰，隔离程度可达

OD5以上。